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垂吊矮牽牛組織培養(yǎng)技術(shù)研究

2007-04-13 08:00:00    作者:楊永花     來源:園林科技     瀏覽次數(shù):

楊永花

(蘭州市園林科學研究所730070)

垂吊矮牽牛(Petunia?Spreding)為茄科矮牽牛屬的多年生蔓生植物,是近年來較為時尚的垂吊型花卉裝飾植物。目前該品系主要依靠從國外引進F1代種子進行播種繁殖,但種子價格昂貴(單價2.5/),細小,播種難度大,種子繁殖又易發(fā)生變異,出現(xiàn)雜色,而扦插繁殖苗分枝力弱,株型單薄,嚴重影響其觀賞價值。播種、扦插都難以在短時間內(nèi)生產(chǎn)出批量的優(yōu)質(zhì)種苗。因此,采用組織培養(yǎng)技術(shù)進行快速繁殖,可解決繁殖系數(shù)低、種子價格昂貴等問題,從而滿足市場的大量要求。

  一、材料與方法

  1?取材與消毒
  在日光溫室中選擇生長健壯、無病蟲害植株的幼嫩葉片,作為外植體材料,用自來水沖洗干凈,再用蒸餾水沖洗23次,置于超凈工作臺上,先用70%的酒精浸泡10秒鐘,無菌水沖洗一次,再用1‰的升汞消毒56分鐘,無菌水沖洗45次,待接種。
  2?培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件(培養(yǎng)基單位mg/L)
  試驗所選用的培養(yǎng)基為(1)MS+6BA1+NAA0.1;(2)MS+6BA2+NAA0.2;(3)MS+6BA0.5+NAA0.1(4)MS+KT0.5+NAA0.1;(5)1/2MS;(6)1/2MS+IBA0.1(7)1/2MS+IBA0.2;(8)1/2MS+NAA0.03。以上培養(yǎng)基中均加入瓊脂3.3g/L,MS中加入白糖30g/L,1/2MS中加入白糖20g/L,pH值均為5.8,培養(yǎng)溫度(25±2),光照強度1500LX2000LX,光照時間1012h/d。
  3?實驗方法
  將葉片剪成1cm2大小的方塊,接種在培養(yǎng)基(1)(2)中,誘導愈傷組織及不定芽的形成。每處理10塊葉片,待外植體萌發(fā)產(chǎn)生密集的不定芽叢后,分割成1cm2大小的方塊,繼代培養(yǎng)在(3)(4)中,每處理接20塊不定芽叢。培養(yǎng)10天后統(tǒng)計高于2cm的健壯幼苗,并將高于2cm的健壯幼苗剪切下來轉(zhuǎn)接到(5)(8)中進行生根,每處理接40棵幼苗,培養(yǎng)一周后統(tǒng)計幼苗生根情況。當生根試苗根系生長至1cm以上,苗高45cm時進行移栽。

  二、試驗結(jié)果

  1?芽誘導分化
  接種到培養(yǎng)基(2)中的葉片,培養(yǎng)1周后,葉片邊緣開始出現(xiàn)淡綠色愈傷組織,葉片漸變厚并彎曲成拱形狀,2周后愈傷組織上出現(xiàn)綠色突起(即芽點),3周開始分化,產(chǎn)生密集的叢生芽,誘導率達100%。接種到培養(yǎng)基(1)中的葉片培養(yǎng)10天后,葉片邊緣開始出現(xiàn)淺綠色愈傷組織,葉片加厚,并膨大凸起。3周后愈傷組織上出現(xiàn)稀少的綠色芽點,1個月后開始分化產(chǎn)生叢生芽,誘導率達90%。葉片在培養(yǎng)基(2)中比(1)中分化所需時間短,分化率高,且產(chǎn)生密集的叢生芽。因此,MS+6BA2+NAA0.2更適宜葉片誘導培養(yǎng)。
  2?芽的增殖繼代
  繼代于(3)中的葉片不定芽叢培養(yǎng)10天后,每塊不定芽可增殖1520個高于2cm的幼苗,但幼苗莖桿細弱,需經(jīng)過壯苗培養(yǎng)才能轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中進行生根。繼代于(4)中的不定芽叢培養(yǎng)10天后,每塊不定芽均可增殖3040個高于2cm的幼苗,且幼苗莖桿粗壯,葉片濃綠,生長勢強,可直接轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中進行生根。因此,MS+KT0.5+NAA0.1是叢生芽增殖的最佳繼代培養(yǎng)基。
  3?生根培養(yǎng)
  健壯幼苗在生根培養(yǎng)基(5)(6)中,培養(yǎng)5天后開始生根,培養(yǎng)10天后,(5)中幼苗根細弱,每株平均有12條根,部分幼苗葉尖變白,(6)中幼苗根粗壯,平均有20條根,幼苗生長旺盛,(7)中幼苗7天開始生根,根粗短,平均只有9條根,(8)中幼苗8天開始生根,根粗短,平均有16條根,幼苗生長健壯。因此,從開始生根天數(shù)、平均根數(shù)及幼苗生長勢看,1/2MS+IBA0.1為幼苗最佳生根培養(yǎng)基,根多而粗壯。

  三、煉苗與移栽
  生根苗根系長至1cm以上,株高45cm時即可進行煉苗移栽。移栽前先在自然條件下打開瓶口煉苗23天,輕取試管苗,用溫水洗干凈根部粘附的培養(yǎng)基,移栽到新的蛭石基質(zhì)中,用1‰的多菌靈溶液澆濕基質(zhì),用75%的遮蔭網(wǎng)遮蔭保濕,1周后逐漸通風透光,生長適溫控制在22左右。

  四、小結(jié)與討論
  1?通過組織培養(yǎng)技術(shù)可快速生產(chǎn)出垂吊矮牽牛幼苗,解決了其種子依靠進口等問題,降低了生產(chǎn)成本,為大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)種苗提供了一條捷徑。生產(chǎn)的植株分植習性好,葉片濃綠,花色鮮艷,花期長。
  2?在實驗范圍內(nèi),垂吊矮牽牛葉片誘導愈傷組織形成叢生芽的最佳培養(yǎng)基為MS+6BA2+NAA0.2,最佳增殖繼代培養(yǎng)基為MS+KT0.5+NAA0.1,最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.1。
  3?生根試管苗根系長至1cm以上,株高45cm時即可煉苗移植,移栽成活率達95%以上。

 

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